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荧光剂藻蓝蛋白在生化标记上的应用

藻蓝色素具有强烈的荧光性 ,发橙红色荧光 ,而其本身则呈蓝色。与传统的荧光探针相比 ,藻胆蛋白类荧光探针具有较小的荧光背景 ,不易淬灭等特点 ,并且有利于激发光的选择 ,较大程度地提高了荧光检测的灵敏度。


藻蓝色素具有强烈的荧光性 ,发橙红色荧光 ,而其本身则呈蓝色。
藻胆蛋白是一系列新型的荧光标记探针 ,具有优良的荧光特性 . 以藻胆蛋白荧光探针标记抗体还可用于血清可溶性抗原 (或抗体 )的荧光免疫检测 . 其标记方法可分为直接法和间接法.它是一类新型的荧光探针 ,目前已应用于免疫组化、荧光免疫分析领域 . 因此研究藻胆蛋白系列荧光探针及其标记方法对藻胆蛋白类荧光探针的开发和利用具有重要的意义.
以荧光标记物为探针的 FIA是历史悠久的一种标记免疫分析 ,采用化学方法使荧光染料标记的抗体 (或抗原 )与组织或细胞中的相应抗原(或抗体 )结合 ,定性或定位地检查抗原或抗体. 它不仅在传染病诊断上有着很广的用途 ,如果结合单克隆抗体还可用于鉴定淋巴细胞亚类 ,使用流式细胞仪 ( FACS)可自动检测细胞的大小和荧光强度.


藻蓝蛋白E25

藻胆蛋白荧光特性
用于免疫荧光分析 ,藻胆蛋白荧光探针具有传统荧光染料无法比拟的优越性 :
1)在含水环境中高度可溶 ,非特异性结合的影响小. 各种藻胆蛋白的等电点均位于 pH 4. 7~ 5. 3范围内 ,在生理 p H值条件下 ,藻胆蛋白和细胞表面都带负电荷 ,其非特异性结合少.
2)所发荧光不为其它生物物质自发淬灭.
3)藻胆蛋白的吸光度和荧光量子产率很高 , 并且与环境的 p H值无关 ,有利于提高灵敏度.
4) 藻胆蛋白的荧光激发和发射的 S TOK ES 位移较大 ,但根据能量转移原理可使用特殊的技术构建两种藻胆蛋白的分子间交联体或藻胆蛋白与其它荧光染料的结合物 ,使其 STOKES位移更为扩大 ,发射的荧光更趋近于可见光谱的红端 ,减少和排除了样品本底荧光、拉曼散射、瑞利散射的干扰.
5)藻胆蛋白易于与其它分子结合 ,形成多种交联体可以用位于可见光区的单一激发光激发 , 发射不同颜色的荧光. 可利用作二色、三色等多色标记 ,分别标记不同的单抗 ,实现多组分同时测定. 藻胆蛋白在 pH 4~ 11的范围内其吸收光谱和荧光光谱几乎不变 ,与单抗结合也不改变其吸收光谱和荧光光谱 .

藻蓝蛋白E18

与传统的荧光探针相比 ,藻胆蛋白类荧光探针具有较小的荧光背景 ,不易淬灭等特点 ,并且有利于激发光的选择 ,较大程度地提高了荧光检测的灵敏度.除此以外 ,藻胆蛋白荧光探针运用于免疫检测还具有一个很大的特点 ,即荧光保存期较长 . 我们在检测血清可溶性抗原时 ,以 R-藻红蛋白探针作为阳性样品的荧光标记 ,在长达 3个月的保存期内阳性检测结果的荧光损失极小。


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